Lowry法蛋白濃度測定試劑盒現貨
Lowry法蛋白濃度測定試劑盒
          
試劑盒組成  | 包裝(1000微孔)  | 保存  | 
Folin酚甲試劑A  | 100ml×2  | 2-8℃  | 
Folin酚甲試劑B  | 5ml  | 2-8℃  | 
Folin酚乙試劑(1N)  | 20ml  | 2-8℃  | 
PBS稀釋液  | 30ml  | 2-8℃  | 
BSA蛋白標準 (5mg/ml BSA)  | 1ml  | -20℃  | 
本試劑盒自訂購之日起一年內有效。本試劑盒用于酶標板或者200ul比色皿時可做1000孔。當使用2ml比色皿時可做100孔,如果是1ml比色皿時可做200孔。
Lowry法蛋白濃度測定試劑盒現貨
產品簡介
Folin-酚試劑法包括兩步反應:*步是在堿性條件下,蛋白質與銅作用生成蛋白質-銅絡合物;第二步是此絡合物將Folin試劑還原,產生深藍色,顏色深淺與蛋白質含量成正比。定量范圍為5~100μg/ml蛋白質。Folin試劑顯色反應由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此樣品中若含有酚類、檸檬酸和巰基化合物均有干擾作用。此外,不同蛋白質因酪氨酸、色氨酸含量不同而使顯色強度稍有不同。
使用說明
一,酶標儀法
1. 根據需要量,將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50:1混合,其有效期為24小時,過期失效。
2. 稀釋標準品:取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0, 2, 4,6,8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中,加PBS補足到20微升。
3. 將樣品作適當稀釋(多做幾個梯度,如作2倍、4倍、8倍稀釋),加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差,標準線前面的點可能不很準確,所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4. 將配好的Folin酚甲試劑每孔加入200微升,輕輕震動,混勻,室溫放置10分鐘。
5. 各孔加入20微升Folin酚乙試劑,迅速混勻,37℃放置30分鐘。用酶標儀測定A650,根據標準曲線計算出蛋白濃度。
6. 使用溫箱孵育時,應注意防止因水粉蒸發影響檢測結果。
二,分光光度計法
如沒有酶標儀,可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。步驟如下:
1. 根據需要量,將Folin酚甲試劑A和Folin酚甲試劑B按50:1混合,其有效期為24小時,過期失效。
2. 稀釋標準品:取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升(標準品一般可用PBS稀釋),使終濃度為0.5mg/ml。
3. 取八支(或者更多)5ml離心管,標讓號,按下表加入試劑。
離心管號  | 1  | 2  | 3  | 4  | 5  | 6  | 7(樣品管1)  | 8(樣品管2)  | 9(樣品管3)  | 
標準蛋白BSA  | 0  | 40ul  | 80ul  | 120ul  | 160ul  | 200ul  | 200ul適當稀釋的樣品1  | 200ul適當稀釋的樣品2  | ……  | 
PBS  | 200ul  | 160ul  | 120ul  | 80ul  | 40ul  | 0  | 0  | 0  | 0  | 
Folin酚甲試劑  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 2ml  | 
混勻,室溫放置10分鐘  | |||||||||
Folin酚乙試劑  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 200ul  | 
4.混勻,37℃放置30分鐘。用分光光度計測定A650.
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