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Gibco原裝膠原酶樣品采集操作步驟

發(fā)布時間: 2017-09-27  點擊次數(shù): 2285次
Gibco原裝膠原酶具有*的消化天然膠原和變性膠原的能力。可選擇性作用于變性和未變性膠原,使之降解,而一般蛋白酶僅作用于變性膠原。創(chuàng)口壞死組織即通過膠原纖維附著于基底,Gibco原裝膠原酶可使創(chuàng)口邊緣膠原纖維降解,具有較好的清創(chuàng)作用,繼而促使肉芽生長,上皮化,加快創(chuàng)口愈合。對正常血管和神經(jīng)組織無損傷作用。
 
Gibco原裝膠原酶樣品采集操作步驟
實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫,試劑不能直接在37溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1、加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37溫育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2、棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100,酶標(biāo)板加上覆膜,37溫育1小時。
3、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400/每孔,甩干。
4、每孔加檢測溶液B工作液100,加上覆膜,37溫育1小時。
5、棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、每孔加底物溶液90,酶標(biāo)板加上覆膜37避光顯色。
7、每孔加終止溶液50,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物 液的加入順序相同。
8、立即用Gibco原裝膠原酶在450nm波長測量各孔的光密度。
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